Ifølge WHO's statistikker er 25 millioner mennesker i løbet af de sidste 40 år døde af AIDS. Skaderne fra denne infektion er enorme. De fleste af de smittede viste sig at være i Afrika, hvor denne infektion kom fra. Med hiv bliver diagnosen af sygdommen særlig relevant. Sandt nok er der ingen kur mod hiv endnu, men tidlig behandling kan forlænge patientens liv og forbedre kvaliteten.
Diagnose af HIV-infektion
HIV-infektion bestemmes på forskellige stadier ved hjælp af følgende metoder:
- ELISA - enzymimmunoassay.
- Western blot.
- PCR - polymerasekædereaktion.
- Hurtige tests.
PCR-metoden blev udviklet af den amerikanske biokemiker Kary Mullis, som modtog Nobelprisen for den i 1983. I dag betragtes denne metode i medicin til diagnosticering af alle infektioner som den førende på grund af dens nøjagtighed og informationsindhold. HIV er ingen undtagelse i denne henseende.
essensen af analysen
Enhver levende celle indeholder RNA og DNA. Disse nukleinsyrer er i stand til selvkopiering og selvreplikation. For hver infektion er DNA-fragmenter unikke. PÅi biologiske væsker cirkulerer disse fragmenter af nukleinsyrer. De fanges og genkendes af specialudstyr - reaktoren. Dette er grundlaget for metoden. Laboratorieassistenten tæller disse fragmenter. Retrovirus HIV overvåges for RNA. Selv med enkelte kopier af virale partikler kan PCR detektere og tælle dem.
Venøst blod bruges oftest som testvæske. Metodens specielle komponenter binder sig til viruspartiklerne og gør dem sporbare, fordi de fundne fragmenter multipliceres.
I tilfælde af HIV kan resultatet af tilstedeværelsen af virussen opnås længe før klinikken dukker op. På grund af sin høje følsomhed har PCR derfor en så høj diagnostisk værdi. Et stort plus ved PCR er metodens alsidighed. Inkubationsperioden for infektion for PCR er ikke en hindring.
Forskningsomkostning
PCR-metoden er ret dyr. Dette er en af dens store ulemper. Det kræver det nyeste udstyr og højt kvalificeret laboratorieassistent. I lyset af ovenstående udføres PCR-diagnostik ikke i små bebyggelser. Du kan kun blive testet på specialiserede store klinikker.
Omkostningerne ved HIV-DNA-test i Moskva-klinikker starter fra 2.800 rubler, viral belastning (vir alt RNA i plasma) bestemmes ved PCR - fra 8.800 rubler, og HIV-resistens over for proteasehæmmere - fra 16.500 rubler. Som du kan se, er priserne ret høje. PCR kan udføres gratis i offentlige klinikker under MHI-politikken. Vigtig,at proceduren kan foregå anonymt. I registret modtager patienten et nummer, som han kan finde ud af resultatet med. I moderne medicinske centre er der personlige konti for klienter, hvor disse data vil blive indtastet.
Forskningsmål
PCR-diagnostik for HIV er ordineret i sådanne tilfælde:
- Detektion af infektion hos et barn født af en syg mor eller bærer for at bestemme intrauterin infektion.
- Hvis ELISA gav tvivlsomme resultater (PCR for HIV hjælper i dette tilfælde med at stille en endelig diagnose).
- For at opdage det kvantitative indhold af virussen i kroppen.
- Med en positiv immunoblot supplerer de hinanden med PCR.
- Test donorer.
- Til tidlig diagnose af HIV.
- For at bestemme effektiviteten og resistensen over for ART.
Fordelen ved denne analyse er, at PCR for HIV kan udføres selv for børn under et år.
Forskning udføres ofte ikke til primær diagnose, men allerede i gang med behandling. Primær diagnostik er serologiske undersøgelser (de bestemmer niveauet af antistoffer mod HIV). Hvis et falsk-positivt resultat gentages, kan dette være med en lav virusmængde.
PCR diagnosticerer HIV, når der endnu ikke er antistoffer mod det. ELISA-metoden vil i dette tilfælde ikke give et svar.
Og PCR for HIV vil allerede være positiv. Men symptomerne på denne periode med HIV er uspecifikke. Patienten behandles først i lang tid og uden held for ARVI af en praktiserende læge. Man skal huske på, at diagnosen HIV kun er baseret påPCR er ikke sat, det er nødvendigt at bestå andre omfattende tests. PCR-metoden er oftere hjælpe til vanskelige tilfælde.
Forbereder til analyse
Før du tager PCR for HIV, 2 dage før testen, bør du ikke spise fed mad, alkohol. Det er også bedre ikke at anstrenge sig ment alt og fysisk. Hvis patienten får ordineret et immunstimuleringsforløb, stoppes det 2 uger før analysen.
Blod tages bedst om morgenen. Andre biologiske væsker i kroppen (sperm, skedesekret) kan også undersøges, men blod er det bedste materiale. Spyt, sved, urin og tårer bruges ikke, da indholdet af virus i dem er minim alt.
Pluser af PCR til HIV
Fordelene ved metoden er den ekstremt lave sandsynlighed for et falsk positivt resultat, universaliteten af reaktionen for alle biologiske væsker i kroppen. Analyse har en bred vifte:
- Én blodprøve kan bruges til at opdage forskellige infektioner.
- Teknikken haster, resultatet er klar allerede næste dag.
- Konfidens er mellem 85 og 98%.
- Tilstedeværelsen af HIV kan bestemmes 10-14 dage efter infektion (der er ingen antistoffer på nuværende tidspunkt endnu).
- Ingen aldersgrænse, kan udføres umiddelbart fra fødslen.
Udemper ved metoden
Ulemperne ved PCR er som følger:
- Analyseomkostninger.
- Kræver sofistikeret medicinsk udstyr.
- Kræver højt kvalificeret laboratorieassistent og læge,taker analyse.
- Reaktionen er meget følsom, så fejlen kan være 20%.
- Kan resultere i et falsk positivt resultat, hvis patienten har autoimmune processer, onkologi, kroniske infektioner.
- Særlig renholdelse af laboratorielokalerne er nødvendig, fordi virussen kan komme ind i analysen fra luften. Så bliver resultatet forkert.
For laboratorier, der udfører PCR, for at forbedre kvaliteten af diagnostik, er der udviklet særlige strenge foranst altninger i henhold til SanPiN-systemet til intern kontrol. Derudover skal alle arbejdsreglerne med denne teknik overholdes:
- Påkrævet for nøje at følge oplysningerne på reagensglassene.
- Før blodprøvetagning, se igen og sørg for, at analysen er planlagt.
- Sygeplejersken skal mærke rørene korrekt.
- Laboratorieassistenten skal udføre alle manipulationer med biomaterialet korrekt for at forhindre krydskontaminering.
- Testsystemet skal være af fremragende kvalitet.
Kun hvis alle disse betingelser er opfyldt, kan fejlen i svaret kun være omkring 2 % af episoderne.
Analysevarighed
Mange er interesserede i, hvor længe PCR for HIV vil være klar. Diagnosen varer ikke mere end 8 timer. Patienten kan få svar allerede dagen efter. Eksprestest udføres inden for 2 timer.
PCR-pålidelighed
På trods af de mange fordele, anses PCR ikke for at være en ideel diagnostisk metode. Han kontaktes i tilfælde afbehovet for at indhente screeningstest for tilstedeværelsen af HIV i kroppen.
Hvornår tages blod til analyse?
Hvor lang tid skal man tage PCR for HIV? Et pålideligt resultat kan opnås allerede ved blodtagning 4-4 dage efter den påståede infektion. Efter 2 uger vil reliabiliteten for HIV være 98%, og med en periode på 5 dage - 80%. Tilstedeværelsen af et negativt resultat i PCR for HIV vil være pålideligt, men for et absolut nøjagtigt resultat udføres også ELISA
ELISA-analyse vil kun være effektiv, hvis der er antistoffer mod virussen, denne tid kan tage fra 1-3 måneder til seks måneder. Da ELISA giver en højere sandsynlighed (98% -99,9%), kan PCR ikke kaldes en 100% bekræftende test for tilstedeværelsen af HIV-infektion. Men på den anden side er dette den eneste teknik, hvor du ikke behøver at vente på, at antistoffer dukker op.
Med HIV kan PCR give information om effektiviteten af ART, stadiet af HIV-sygdom og antallet af VN'er (en kvantitativ vurdering af tilstedeværelsen af HIV i kroppen). Dette vil tale om ændringens alvor og omfang.
PCR-testning for HIV er også nødvendig, hvis der er antistoffer i blodet, men deres tilstedeværelse indikerer ikke pålideligheden af HIV-infektion klinisk.
De er testet ikke kun for infektion og tilfældig sex. Andre lejligheder:
- Planlægning af graviditet.
- Kommende operation.
- Afslappet sex.
- Nogle erhverv kræver denne test for at blive optaget på arbejde (lærere, læger og andet medicinsk personale).
- Fanger.
- TB-patienter.
- Medarbejdere i ministeriet for nødsituationer og politiet.
- Returnerede fra ferie fra eksotiske lande (hvis du vil sikre dig, at der ikke er nogen infektion).
- Prostituerede.
- Udenlandske studerende.
- Drugs.
Også kan visse symptomer hos en patient fremtvinge en HIV-test:
- Pludselig vægttab.
- Diarré, der varer mere end 3 uger
- Urimelig høj temperatur i lang tid.
- Hævede lymfeknuder.
- Uforklarlig årsag til lungebetændelse, candidiasis osv.
Dechifrering af analysen er den behandlende læges privilegium, ikke laboratorieassistenten.
PCR eller ELISA, hvad er bedre?
Når PCR-diagnose af HIV-virus RNA påvises både kvalitativt og kvantitativt. Denne analyse identificerer klart et specifikt patogen, selvom der er flere krydsreagerende patogener. Biologisk materiale kan bruges selv i tørret form. Ulempen er den høje følsomhed ved PCR, når et falsk positivt resultat kan gives ved tilstedeværelsen af selv en lille mængde fremmed DNA på instrumenter eller et reagensglas.
Opgaven og muligheden for ELISA er at bestemme tilstedeværelsen af antistoffer mod et retrovirus. Selvom dens nøjagtighed er 99 %, er den ikke anvendelig i de tidlige stadier.
Kvalitativ HIV-test
Højkvalitets PCR til HIV bestemmer tilstedeværelsen af virussen i kroppen. Resultaterne i dette tilfælde vil se således ud: positive, falsk positive, negative. Men denne undersøgelse vil ikke give oplysninger om mængden af retrovirus. Sådan en kvalitativ analyseupassende, når HIV-infektion allerede er blevet opdaget i kroppen på anden måde.
Det er umuligt at kontrollere effektiviteten af behandlingen med PCR af høj kvalitet.
HIV-kvantificering
Udføres kun af HIV-smittede mennesker for at tælle antallet af kopier af virus-RNA i et biologisk produkt.
Formålet med en sådan undersøgelse er at overvåge den igangværende behandling og identificere virussens resistens over for det. Antiviral terapi i sådanne beregninger er ikke blindt ordineret af en læge, så det vil være mere effektivt. Kvantitativ PCR for HIV-infektion udføres meget oftere. Denne analyse vises som en kopi/ml blod.
Hvilke resultater kan gives:
- Virus-RNA er fraværende eller meget lille (ca. 20 kopier/ml). Ingen sikkerhed for diagnosen.
- Fra 20 - til 10 til 6. grads kopier/ml - diagnosen er pålidelig
- Mere end 106 kopier/ml - høj VN.
Laboratorier kan udføre real-time PCR-test for HIV. Dette indebærer observation og numerisk evaluering af akkumulering af PCR-produkter med automatisk registrering af resultater.
